大家好,今天小编来为大家解答以下的问题,关于培养基配方,培养基配方分析这个很多人还不知道,现在让我们一起来看看吧!
培养基的种类较多,常常是不同种的植物要求的培养基成分不同。根据培养植物,选用适宜的培养基。现将常用的几种培养基组成介绍给读者,供参考。
(1)MS培养基
(1)MS培养基
(2)White培养基
(2)White培养基
(3)VacinandWent(VW)培养基
(3)VacinandWent(VW)培养基
(4)KundsonC(KC)培养基
(4)KundsonC(KC)培养基
2.培养基母液的配制和保存
经常配制培养基,为减少工作量及便于低温贮藏,一般配成比所需浓度高10~100倍的母液,配制培养基时只要按比例量取即可。配好的母液需装在棕色小口瓶中,存放在0~4℃冰箱中可使用半年至1年。如发现有沉淀物则不可再用,需重新配制。MS培养基母液配制如下:
3.培养基的配制过程
将母液从冰箱中取出,依次排好,按需要定量吸取,放入量筒中。称取琼脂,加少量水后加热,并不断搅拌,直到全部溶化。再加入称好的糖和前面备好的各种成分,不断搅拌,使之充分混合。测定已配好的培养基氢离子浓度(酸碱度),用0.1~1.0摩尔/升(0.1~1.0摩)氢氧化钠和盐酸将培养基调至所需的浓度。
将配好的培养基分别灌注到培养瓶中(试管或三角瓶),用盖子(棉塞、橡胶塞、铝箔)将瓶盖好,外面再包一层牛皮纸,标明编号。
培养基通常用高压灭菌锅灭菌。气压111.46~121.59千帕(1.1~1.2千克/厘米2压力),10~20分钟。冷却备用。
1、细菌培养基
配方一牛肉膏琼脂培养基
牛肉膏0.3克,蛋白胨1.0克,氯化钠0.5克,琼脂1.5克,
水100毫升
在烧杯内加水100毫升,放入牛肉膏、蛋白胨和氯化钠,用蜡笔在烧杯外作上记号后,放在火上加热。待烧杯内各组分溶解后,加入琼脂,不断搅拌以免粘底。等琼脂完全溶解后补足失水,用10%盐酸或10%的氢氧化钠调整pH值到7.2~7.6,分装在各个试管里,加棉花塞,用高压蒸汽灭菌30分钟。
配方二马铃薯培养基
取新鲜牛心(除去脂肪和血管)250克,用刀细细剁成肉末后,加入500毫升蒸馏水和5克蛋白胨。在烧杯上做好记号,煮沸,转用文火炖2小时。过滤,滤出的肉末干燥处理,滤液pH值调到7.5左右。每支试管内加入10毫升肉汤和少量碎末状的干牛心,灭菌,备用。
配方三根瘤菌培养基
葡萄糖10克磷酸氢二钾0.5克
碳酸钙3克硫酸镁0.2克
酵母粉0.4克琼脂20克
水1000毫升1%结晶紫溶液1毫升
先把琼脂加水煮沸溶解,然后分别加入其他组分,搅拌使溶解后,分装,灭菌,备用。
2、放线菌培养基
配方一淀粉琼脂培养基(高氏培养基)
可溶性淀粉2克硝酸钾0.1克
磷酸氢二钾0.05克氯化钠0.05克
硫酸镁0.05克硫酸亚铁0.001克
琼脂2克水100毫升
先把淀粉放在烧杯里,用5毫升水调成糊状后,倒入95毫升水,搅匀后加入其他药品,使它溶解。在烧杯外做好记号,加热到煮沸时加入琼脂,不停搅拌,待琼脂完全溶解后,补足失水。调整pH值到7.2~7.4,分装后灭菌,备用。
配方二面粉琼脂培养基
面粉60克琼脂20克
水1000毫升
把面粉用水调成糊状,加水到500毫升,放在文火上煮30分钟。另取500毫升水,放入琼脂,加热煮沸到溶解后,把两液调匀,补充水分,调整pH值到7.4,分装,灭菌,备用。
3、真菌培养基
配方一萨市(Sabouraud’s)培养基
蛋白胨10克琼脂20克
麦芽糖40克水1000毫升
先把蛋白胨、琼脂加水后,加热,不断搅拌,待琼脂溶解后,加入40克麦芽糖(或葡萄糖),搅拌,使它溶解,然后分装,灭菌,备用。
本培养菌是培养许多种类真菌所常用的
培养酵母菌所用的培养基和霉菌所用的培养基是一样的,它们都属于真菌。
常用的有PDA培养基、孟加拉红培养基、高盐察氏培养基、酵母粉葡萄糖氯霉素琼脂等等。培养7天后如果菌落长毛的就是霉菌,没有毛的就是酵母菌,形态可能会不一样,因为酵母菌不止一种,不同的酵母菌长出来的形态会不一样。
酵母菌的适宜培养基是米曲培养基,合成培养基有ypd,组成为:葡萄糖2%,蛋白胨1%,酵母膏0.5%。
最简单的培养基:
一)麦芽汁培养基的配制
1.培养基成分
新鲜麦芽汁一般为10-15波林。
2.配制方法
(1)用水将大麦或小麦洗净,用水浸泡6-12h,置于15℃阴凉处发芽,上盖纱布,每日早、中、晚淋水一次,待麦芽伸长至麦粒的两倍时,让其停止发芽,晒干或烘干,研磨成麦芽粉,贮存备用。
(2)取一份麦芽粉加四份水,在65℃水浴锅中保温3-4h,使其自行糖化,直至糖化完全(检查方法是取0.5ml的糖化液,加2滴碘液,如无蓝色出现,即表示糖化完全)。
(3)糖化液用4-6层纱布过滤,滤液如仍混浊,可用鸡蛋清澄清(用一个鸡蛋清,加水20ml,调匀至生泡沫,倒入糖化液中,搅拌煮沸,再过滤)。
(4)用波美比重计检测糖化液中糖浓度,将滤液用水稀释到10-15波林,调pH至6.4。如当地有啤酒厂,可用未经发酵,未加酒花的新鲜麦芽汁,加水稀释到10-15波林后使用。
(5)如配固体麦芽汁培养基时,加入2%琼脂,加热融化,补充失水。
(6)分装、加塞、包扎。
(7)高压蒸汽灭菌100Pa灭菌20min。
扩展资料:
用于酵母菌的培养:
配方:1%YeastExtract(酵母膏),2%Peptone(蛋白胨),2%Dextrose(glucose)(葡萄糖),若制固体培养基,加入2%琼脂粉
配制方法:
1溶解10gYeastExtract(酵母膏),20gPeptone(蛋白胨)于900ml水中,如制平板加入20g琼脂粉
2高压115度15min
3加入100ml20gDextrose(glucose)(葡萄糖),(葡萄糖溶液灭菌后加入)
注:葡萄糖,yeastextract,peptone溶液混合后在高温下可能会发生化学反应,导致培养基成分变化,所以要分别灭菌后再混合。葡萄糖可以过滤除菌,也可以115℃15min灭菌。
参考资料:百度百科-YPD培养基
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